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        液相色譜系統出現故障應該如何應對?

        點擊次數:53 發布時間:2021-03-28
          液相色譜是應用最多的色譜分析方法,液相色譜系統由流動相儲液體瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成,其整體組成類似于氣相色譜,但是針對其流動相為液體的特點作出很多調整。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩;進樣系統要求進樣便利切換嚴密;由于液體流動相粘度遠遠高于氣體,為了減低柱壓液相色譜的色譜柱一般比較粗,長度也遠小于氣相色譜柱。HPLC應用非常廣泛,幾乎遍及定量定性分析的各個領域。
          
          使用液相色譜時,液體待檢測物被注入色譜柱,通過壓力在固定相中移動,由于被測物種不同物質與固定相的相互作用不同,不同的物質順序離開色譜柱,通過檢測器得到不同的峰信號,最后通過分析比對這些信號來判斷待測物所含有的物質。液相色譜作為一種重要的分析方法,廣泛的應用于化學和生化分析中。液相色譜從原理上與經典的液相色譜沒有本質的差別,它的特點是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和微粒固定相,適于分析高沸點不易揮發、分子量大、不同極性的有機化合物。
         

         

          液相色譜系統常見故障及應對措施:
          1、柱壓高:
          原因:緩沖液鹽分沉積于柱內;或者是樣品污染沉積。
          措施:如果是緩沖液鹽分沉積于柱內,則用40~50℃的純水低速正向沖洗柱子,逐漸提高流速沖洗,柱壓大幅度下降后再用常溫純水清洗,最后用純甲醇沖洗柱子30分鐘。
          如果是樣品污染沉積導致,則用純水反向沖洗柱子,再用甲醇沖洗,隨后用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子,再用甲醇沖洗,然后用純水沖洗,最后用甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘。
          
          2、氣泡溢出:
          原因:主要是由于過濾器長期沉浸于乙酸銨等緩沖液內,內部霉菌繁殖形成菌團阻塞了過濾器導致。
          措施:將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中,利用超聲清洗既分鐘?;蛘邔⑦^濾器浸泡于5%硝酸溶液中12~36小時,再用純水清洗,打開purge鍵清洗脫氣,直到沒有氣泡冒出。打開泄壓閥,打開泵,純水沖洗過濾器1小時左右。
          
          3、無壓力指示,也無液體流過:
          原因:泵密封墊圈磨損;或大量氣泡進入泵體。
          措施:更換密封墊圈,或用一個50ml的玻璃針筒在泵的出口處幫助抽出空氣。
          
          4、壓力波動大,流量不穩定:
          原因:系統中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物。
          措施:觀察流動相的量,動相要充分脫氣。如果是單向閥和閥座不能密封,則拆下單向閥,放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清洗。
          
          5、峰面積重復性不佳:
          原因:進樣閥漏液;或加樣針不到位,或者是液量不足。
          
          6、出峰不佳,峰分叉:
          原因:色譜柱被污染,或者柱頭填料塌陷。
          措施:色譜柱被污染則需清洗色譜柱。如果柱頭填料塌陷或硬結,則去除硬結部分,沖新裝入新填料。反復滴甲醇,壓緊不銹鋼桿,直至填滿。柱頭用甲醇沖洗干凈。
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